图书介绍

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膜片钳技术及其应用
  • 康华光等编著 著
  • 出版社: 北京:科学出版社
  • ISBN:7030108868
  • 出版时间:2003
  • 标注页数:242页
  • 文件大小:18MB
  • 文件页数:256页
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图书目录

1 细胞电生理与膜片钳技术1

1.1 细胞的结构1

1.2 细胞膜的化学组成2

1.3 生物电信号的离子机制2

1.3.1 细胞膜上的离子转运3

1.3.2 细胞膜的静息电位和动作电位6

1.4 生物电信号测量基础9

1.4.1 电路中的几个基本定律10

1.4.2 可兴奋细胞膜及其离子通道的等效电路12

1.4.3 生物电信号测量中对仪器的要求15

1.4.4 微电极与导电溶液15

1.5 电生理实验中的基本方法17

1.5.1 双电极电压钳技术17

1.5.2 膜片钳技术18

1.5.3 利用膜片钳技术记录离子通道电流20

1.6 重要概念小结20

2 膜片钳系统的组建及实验技术概要22

2.1 细胞膜离子通道的分类和通道电流的记录模式22

2.1.1 细胞膜离子通道的分类22

2.1.2 通道电流的记录模式23

2.2 膜片钳实验系统的组建25

2.2.1 机械部件25

2.2.2 光学部件27

2.2.3 电子部件27

2.2.4 微操纵器29

2.3 系统接地29

2.4.2 玻璃微电极拉制仪及拉制工艺30

2.4 玻璃微电极控制工艺及设备30

2.4.1 玻璃毛坯管30

2.4.3 电极熔锻仪和优化处理31

2.4.4 电极充灌31

2.4.5 电极夹持器32

2.4.6 浴池电极32

2.5 实验技术概要33

2.5.1 膜片钳的工作模式33

2.5.2 实验前的准备工作34

2.5.3 实验步骤35

2.5.4 注意事项37

2.6 重要概念小结39

3.1.1 膜片钳的定义40

3.1.2 膜片钳放大器40

3.1 膜片钳放大器原理40

3 膜片钳放大器原理与设计40

3.1.3 前置放大电路的两种方案41

3.2 I-V变换器的背景噪声43

3.2.1 反馈电阻的噪声43

3.2.2 放大电路中的噪声44

3.3 低噪声放大器设计举例46

3.4 频率响应和带宽扩展47

3.5 动态误差及其补偿技术49

3.5.1 快电容暂态失真及其补偿49

3.5.2 慢电容暂态失真及其补偿50

3.5.3 串联电阻引起的钳位误差及其补偿52

3.5.4 阻容补偿电路举例55

3.6 0PC-IB型膜片钳放大器设计56

3.7 计算机控制的膜片钳放大器简介58

3.8 重要概念小结60

4 单通道电流记录技术62

4.1 细胞贴附式记录模式62

4.1.1 高阻封接62

4.1.2 保证高阻封接的条件63

4.1.3 单通道电流记录举例64

4.2 离体膜片的单通道电流记录64

4.2.1 膜内朝外式65

4.2.2 膜外朝外式65

4.3 离子通道的辨识66

4.4.1 电压门控制型单一离子电流67

4.4 单一离子电流的记录数据67

4.4.2 配体门控通道的单一离子电流69

4.5 重要概念小结69

5 全细胞记录技术71

5.1 基本实验步骤71

5.2 全细胞记录模式的电学分析法72

5.2.1 电路模型及阻容参数补偿72

5.2.2 噪声分析73

5.2.3 复杂细胞的电路模型73

5.3 全细胞记录模式的化学分析法76

5.3.1 电极与细胞之间的扩散建模76

5.3.2 两段模型的解76

5.3.3 全细胞记录模式中的电极充灌78

5.3.4 穿孔膜片钳技术78

5.3.5 有效膜电位的变化——液结电位及其校正81

5.4 全细胞记录技术的应用82

5.5 重要概念小结82

6 数据采集与分析83

6.1 数据采集硬件系统83

6.1.1 基本概念和术语83

6.1.2 计算机系统84

6.1.3 数据采集器86

6.2 电生理学研究用软件88

6.2.1 操作系统88

6.2.2 电生理实验专用软件89

6.3 数据分析89

6.3.1 模拟信号预处理和数据采集参数的选择89

6.3.2 单通道电流信号分析90

6.4 重要概念小结99

7 细胞分泌活动的膜电容监测技术101

7.1 全细胞记录模式的电路模型102

7.2 膜电容监测的时域法103

7.3 膜电容监测的频域法104

7.3.1 正弦加值流技术104

7.3.2 分段线性技术106

7.3.3 膜电容监测的虚拟仪器系统109

7.4 膜电容监测实例113

7.5 膜电容监测中应当注意的几个实际问题114

7.5.1 选择一个合适的基础技术114

7.5.2 膜电容测量的误差及其改进措施115

7.6 重要概念小结116

8.1.1 细胞分泌物质的氧化还原过程117

8.1 安培测量技术原理117

8 细胞分泌活动的安培测量技术117

8.1.2 安培测量技术原理118

8.1.3 定量电化学119

8.2 测量仪器与设备120

8.2.1 碳纤维电极120

8.2.2 放大器及测量系统122

8.3 实验数据示例123

8.4 安培测量与膜电容监测的联合运用126

8.4.1 记录模式126

8.4.2 记录数据126

8.4.3 结论与展望128

8.5 重要概念小结128

9.1 细胞内钙离子浓度的自稳平衡130

9 细胞内钙离子浓度的测量及钙库特性130

9.2 钙离子荧光染料的激发和发射光谱133

9.2.1 荧光133

9.2.2 激光光谱和发射光谱133

9.3 细胞内钙离子浓度的测量136

9.3.1 测量方法与钙离子浓度的计算136

9.3.2 测量仪器与系统136

9.3.3 测量结果举例138

9.4 细胞内的钙库特性及钙诱发的钙释放143

9.4.1 钙库特性144

9.4.2 钙离子诱发的钙释放145

9.5 锁定化合物的闪光分解147

9.5.1 光照作用与光化学反应147

9.5.3 锁定化合物光解的应用举例149

9.5.2 锁定化合物的结构和特性149

9.6 重要概念小结150

10 脑切片膜片钳技术152

10.1 脑切片152

10.1.1 脑切片的制备与维护152

10.1.2 从脑组织的不同部位制备切片153

10.1.3 动物的品种和年龄153

10.2 脑切片膜片钳记录技术154

10.2.1 仪器设备154

10.2.2 电极内液和外液的配制155

10.2.3 切片上神经元和神经蚀质细胞的辨识156

10.2.4 记录前的准备工作156

10.2.5 几种前的准备工作159

10.3.1 常规成像技术161

10.3 脑切片膜片钳技术与其他方法的结合161

10.3.2 共聚集成像技术165

10.3.3 多光子成像167

10.4 重要概念小结170

11 心室肌细胞的药理特性171

11.1 异唾淋类生物碱及其心血管电生理简介171

11.2 心室肌细胞电压门控离子通道172

11.2.1 心室肌细胞电压门控钾通道172

11.2.2 心室肌细胞电压门控钙通道173

11.3 心肌动作电位174

11.4 琢鼠心室肌细胞的电生理特性176

11.4.1 琢鼠心室肌的全细胞记录176

11.4.2 琢鼠心室肌细胞的单通道记录177

11.5.1 粉防已碱对心肌Ca2+通道的影响178

11.5 琢鼠心室肌细胞的药理特性178

11.5.2 莲心碱对心肌钙通道的影响181

11.6 重要概念小结183

12 研究植物细胞离子通道特性的方法185

12.1 植物为什么需要离子通道186

12.1.1 溶质转运186

12.1.2 非通道性的溶质转运190

12.1.3 转运溶剂的水通道190

12.2 植物细胞膜的制备190

12.2.1 质膜190

12.2.2 内膜193

12.3 植物膜的膜片钳记录模式196

12.4 重要概念小结197

A.1.1 扩散运动的费克(Fick)定律198

A.1.2 漂移运动的欧姆定律198

附录A 细胞膜离子运动的物理描述和数学描述198

A.1 支配离子运动的物理定律198

A.1.3 扩散与迁移之间的爱因斯坦关系199

A.1.4 空间电荷呈中性(电荷分离原理)199

A.2 离子运动的数学描述199

A.2.1 能斯特-普朗克方程199

A.2.2 能斯特方程200

A.2.3 哥德门-霍奇金-卡兹(GHK)模型201

附录B 基本电学和电子电路203

B.1 电学和电气测量的术语203

B.2 电路中若干电学量的定义和单位206

B.3.1 理想放大器213

B.3 放大器213

B.3.2 电压放大器214

B.3.3 互阻放大器214

B.3.4 电压跟随器215

附录C 细胞电生理学中的光学方法216

C.1 若干定义和术语216

C.2 显微镜218

C.2.1 复合型显微镜219

C.2.2 物镜220

C.3 光成像方法221

D.1.1 分离与培养用液222

D.1.2 细胞分离与培养222

D.1 肾上腺嗜铬细胞222

附录D 细胞培养技术与实验用液222

D.1.3 实验用液223

D.2 胰腺月细胞223

D.2.1 试剂及分离、培养用液223

D.2.2 胰岛的分离223

D.2.3 单细胞的分离和培养224

D.2.4 实验用试剂和溶液224

D.3 心室肌细胞225

D.3.1 溶液成分225

D.3.2 细胞分离225

参考文献226

符号、单位和物理常数表239

作者简介241

英文简明目录242

索引(汉英对照)243

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