图书介绍
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- 陈雪岚主编 著
- 出版社: 北京:科学出版社
- ISBN:9787030333742
- 出版时间:2012
- 标注页数:97页
- 文件大小:9MB
- 文件页数:105页
- 主题词:基因工程-实验-高等学校-教材
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图书目录
实验1基因组DNA的提取1
实验1.1植物基因组DNA的提取2
实验1.2动物基因组DNA的提取3
实验1.3细菌基因组DNA的提取4
实验1.4酵母菌基因组DNA的提取5
实验2总RNA和mRNA的提取8
实验2.1 Trizol法提取总RNA9
实验2.2异硫氰酸胍/酚一步法提取总RNA10
实验2.3总RNA提取试剂盒11
实验2.4 mRNA的分离纯化12
实验3质粒DNA的提取15
实验3.1碱裂解法少量提取质粒DNA17
实验3.2少量质粒提取试剂盒19
实验4目的基因的获得21
实验4.1 PCR扩增26
实验4.2反转录PCR27
实验5限制性内切酶的酶切反应30
实验5.1 pUC18/19质粒DNA的EcoRI单酶解32
实验5.2 Hind ⅢⅢ和Sal I对pUC18/19质粒DNA的双酶切33
实验6凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化35
实验7 DNA片段的体外连接37
实验8大肠杆菌感受态细胞的制备40
实验9重组子的转化42
实验10菌落PCR筛选阳性重组子45
实验11重组质粒的酶切鉴定47
实验12外源基因在大肠杆菌中的诱导表达49
实验13基因表达产物的检测分析:SDS-PAGE53
实验14 Western Blotting(蛋白免疫印记)实验59
实验15 Southern印迹实验63
实验16全长cDNA文库的构建68
实验17凝胶阻滞实验78
实验18染色质免疫共沉淀技术82
参考文献87
附录一 基因工程实验中的常用数据和换算关系89
附录二 基因工程实验常用试剂、溶液和缓冲液92
附录三PCR实验引物设计原则95