图书介绍

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基因工程实验
  • 陈雪岚主编 著
  • 出版社: 北京:科学出版社
  • ISBN:9787030333742
  • 出版时间:2012
  • 标注页数:97页
  • 文件大小:9MB
  • 文件页数:105页
  • 主题词:基因工程-实验-高等学校-教材

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图书目录

实验1基因组DNA的提取1

实验1.1植物基因组DNA的提取2

实验1.2动物基因组DNA的提取3

实验1.3细菌基因组DNA的提取4

实验1.4酵母菌基因组DNA的提取5

实验2总RNA和mRNA的提取8

实验2.1 Trizol法提取总RNA9

实验2.2异硫氰酸胍/酚一步法提取总RNA10

实验2.3总RNA提取试剂盒11

实验2.4 mRNA的分离纯化12

实验3质粒DNA的提取15

实验3.1碱裂解法少量提取质粒DNA17

实验3.2少量质粒提取试剂盒19

实验4目的基因的获得21

实验4.1 PCR扩增26

实验4.2反转录PCR27

实验5限制性内切酶的酶切反应30

实验5.1 pUC18/19质粒DNA的EcoRI单酶解32

实验5.2 Hind ⅢⅢ和Sal I对pUC18/19质粒DNA的双酶切33

实验6凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化35

实验7 DNA片段的体外连接37

实验8大肠杆菌感受态细胞的制备40

实验9重组子的转化42

实验10菌落PCR筛选阳性重组子45

实验11重组质粒的酶切鉴定47

实验12外源基因在大肠杆菌中的诱导表达49

实验13基因表达产物的检测分析:SDS-PAGE53

实验14 Western Blotting(蛋白免疫印记)实验59

实验15 Southern印迹实验63

实验16全长cDNA文库的构建68

实验17凝胶阻滞实验78

实验18染色质免疫共沉淀技术82

参考文献87

附录一 基因工程实验中的常用数据和换算关系89

附录二 基因工程实验常用试剂、溶液和缓冲液92

附录三PCR实验引物设计原则95

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