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第1章　组织学和组织化学1

第一节　常规组织学标本制作法1

一、显微玻片标本的种类1

二、组织学切片的制作程序2

三、生物染色剂和染色原理2

四、石蜡、冷冻切片及HE染色标本制作方法5

五、其他常用的特殊染色法11

第二节　组织化学15

一、组织化学概论15

二、组织化学的组织处理和切片法21

三、组织化学成分定位分析24

四、缓冲液的配制29

五、组织化学方法34

第2章　组织培养和细胞培养84

第一节　细胞培养的基本概念84

一、体外培养、细胞系、细胞株和克隆的概念84

二、组织培养的应用范围和价值85

三、组织培养的发展史85

四、现代组织培养85

第二节　细胞培养的基本条件87

一、细胞培养必备的设施87

二、细胞培养常用器材及处理方法88

三、常用溶液和培养液88

四、影响细胞生长的基本因素88

第三节　基本的培养技术89

一、取材的基本要求89

二、初代细胞的培养方法89

第四节　培养细胞的生物学特性92

一、体内外细胞差异和分化92

二、培养细胞形态分类92

三、培养细胞的形态结构94

四、培养细胞的生长和增殖过程95

五、培养细胞增殖动力学98

六、组织培养细胞遗传学特征98

七、细胞和细胞、细胞和基质的相互关系99

第五节　培养细胞生物学性状的检测99

一、培养细胞形态的观察99

二、细胞生长状况的检测99

第六节　正常组织细胞的培养方法100

一、上皮细胞的培养100

二、肌组织——心肌细胞的培养102

三、神经组织和神经干细胞的培养102

四、结缔组织成纤维细胞的培养104

第3章　免疫组织化学106

第一节　免疫组织化学的概念和分类106

第二节 免疫组织化学特异性的分子生物学基础107

一、抗原107

二、抗体107

第三节　免疫组织化学的基本方法118

一、组织玻片标本的制备和抗原保存118

二、常用免疫组织化学染色方法120

第四节　免疫组织化学染色效果的监测134

第4章　原位杂交组织化学137

第一节　原位杂交组织化学概述137

一、原位杂交组织化学技术发展简介137

二、探针的种类138

第二节　原位杂交组织化学技术的基本方法138

一、防止RNA酶污染138

二、玻片处理和组织固定139

三、样品预处理139

四、预杂交140

五、杂交140

六、杂交后处理142

七、显示142

八、对照实验和ISHH结果的判断142

第三节　探针标记原理144

第四节　几种常用检测RNA的原位杂交组织化学方法146

一、地高辛标记的DNA探针进行原位杂交146

二、cRNA探针检测组织切片中的RNA147

三、地高辛标记寡核苷酸探针检测RNA150

第五节 原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法151

第六节　荧光原位杂交152

一、荧光原位杂交原理153

二、荧光原位杂交技术153

三、荧光原位杂交和引物原位标记技术基本操作方法155

第5章　细胞凋亡检测157

第一节　细胞凋亡的一般概念157

一、细胞凋亡与细胞程序性死亡157

二、细胞凋亡与坏死的区别158

第二节　细胞凋亡的生物学特征158

一、形态学变化158

二、生物化学变化159

第三节　细胞凋亡的信号通路159

第四节　细胞凋亡检测方法160

一、细胞凋亡的形态学检测161

二、DNA片段化检测162

三、膜联蛋白V法163

四、线粒体跨膜电位的检测164

五、Caspase-3活性的检测164

六、流式细胞术164

七、其他检测方法165

第6章　定量细胞学和组织学技术167

第一节　图像分析技术167

一、图像分析仪的组成168

二、图像处理的基本方法169

三、图像分析仪的定量检测170

四、图像分析操作步骤及结果分析172

五、图像分析技术在生物医学中的应用173

第二节　流式细胞术175

一、流式细胞仪工作原理175

二、流式细胞仪的测量和常见图形176

三、流式细胞术的样品制备178

四、流式细胞术的应用182

第三节　显微分光光度术185

一、显微分光光度计的结构与工作原理185

二、显微吸收光度术187

三、显微荧光光度术187

第7章　电子显微镜技术189

第一节　透射电镜简介189

一、透射电镜的原理189

二、透射电镜的结构190

第二节 常规超薄切片技术192

一、取材193

二、固定194

三、脱水197

四、包埋197

五、切片198

六、染色198

七、超薄切片技术在生物医学中的应用199

第三节　负染色技术200

一、负染色主要试剂配制200

二、操作方法200

三、负染色技术在生物医学中的应用201

第四节　冷冻复型技术202

一、基本原理202

二、所需的主要设备和材料202

三、操作方法203

四、冷冻复型标本中膜的命名203

五、冷冻蚀刻技术在生物医学中的应用204

第五节 电镜酶细胞化学技术204

一、酶细胞化学技术的基本原理205

二、电镜酶细胞化学技术的一般步骤206

三、常见酶的电镜细胞化学207

四、电镜酶细胞化学技术在生物医学中的应用211

第六节　免疫电镜技术211

一、酶免疫电镜技术212

二、胶体金免疫电镜技术212

三、免疫铁蛋白技术216

第七节　电镜放射自显影技术217

一、放射自显影术的原理及应用217

二、电镜发射自显影术的操作217

第八节　扫描电镜技术218

一、扫描电镜原理和特点219

二、扫描电镜样品制备的基本程序219

三、几种特殊的扫描电镜样品制备技术223

第8章　免疫组织化学技术在病理诊断及研究中的应用226

第一节　免疫组织化学染色方法和检测系统226

第二节　免疫组织化学染色的反应结果和质量控制227

一、免疫组织化学染色的反应结果227

二、免疫组织化学的标准化及质量控制229

第三节 免疫组织化学染色技术在病理诊断中的意义和应用232

一、病理诊断中常用抗体的选择232

二、抗原在细胞中的定位235

三、免疫组织化学阳性标记的组织学特征240

四、免疫组织化学技术在临床病理诊断及研究中的应用和意义242

常见缩略语英汉对照表252