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第一章 常规技术1

一、组织制片1

二、动物麻醉法2

第一节 组织取材2

一、尸检组织取材3

二、外科活检组织取材3

三、组织取材注意事项4

第二节 组织的固定4

一、固定的目的和意义4

二、固定的方法5

三、组织固定与温度的关系6

四、注意事项6

五、固定液7

第三节 组织冲洗脱水与透明17

一、组织冲洗17

二、组织脱水18

三、组织透明19

第四节 组织浸蜡与包埋19

一、浸蜡19

二、包埋20

第五节 组织切片22

一、切片机22

二、切片刀22

三、磨切片刀的器具及磨刀法22

四、切片技术24

一、染料分类与化学结构33

第六节 染料与染色33

二、染料的性质38

第七节 常规染色技术43

一、苏木素精染色液的配制43

二、伊红Y的促染剂与染色液44

三、盐酸分化液44

四、HE染色的步骤45

五、注意事项46

第八节 脱落细胞46

一、脱落细胞的取材方法和原则46

二、脱落细胞的染色方法48

三、脱落细胞染色的应用51

一、直接冰冻切片法52

第九节 冰冻切片52

二、明胶冰冻切片法53

三、冰冻切片粘片法54

四、快速石蜡切片诊断54

第二章 特殊染色及组织化学56

第一节 特殊染色及组织化学的基本知识56

一、染色方法56

二、染色目的56

三、染色原理56

四、染色分类57

五、组织化学的基本概念58

六、组织化学的进展58

第二节 糖原和粘液物质染色59

一、糖原59

八、组织化学技术应掌握的要点59

七、组织化学的方法和种类59

二、粘液物质66

第三节 病理性色素及沉着物的组化染色75

一、含铁血黄素75

二、胆色素78

三、黑色素80

四、纤维素83

五、淀粉样物质88

六、尿酸盐92

七、钙质95

第四节 结缔组织和肌肉组织染色99

一、胶原纤维99

二、网状纤维103

三、弹力纤维107

四、结缔组织多色染色法109

五、肌肉组织111

第五节 病原体染色114

一、细菌114

二、真菌117

三、螺旋体120

四、乙型肝炎表面抗原121

第六节 脂类染色123

一、脂类染色的应用123

二、染色方法123

第七节 核酸和核仁组成区的组化染色128

一、核酸128

二、核仁组成区131

第八节 内分泌和单种细胞的组化染色135

一、脑垂体细胞135

二、嗜铬细胞136

三、产肽细胞系137

四、肥大细胞138

五、潘氏细胞140

第九节 酶类的组化染色141

一、水解酶类141

二、氧化酶和过氧化酶类147

三、脱氢酶类150

四、γ—谷氨酰转肽酶151

第三章 免疫组织化学染色153

二、细胞标本的取材和保存154

一、组织标本的取材及保存154

第一节 免疫组织化学染色前的基本技术154

三、固定155

四、组织脱水、浸蜡及包埋156

五、组织切片157

第二节 免疫组化染色158

一、染色实验计划158

二、内源性酶和内源性生物素的阻断159

三、蛋白酶消化159

四、抗体的稀释度160

五、缓冲液161

六、底物溶液162

七、免疫荧光染色方法164

八、免疫酶细胞化学染色方法165

九、亲和免疫细胞化学染色法169

十、亲和素－生物素－复合物系统的免疫组化染色法172

第三节 免疫组化染色对照及结果的判断173

一、正确设计免疫组化对照的方法173

二、结果的判断177

第四节 免疫组织化学的双重和多重染色技术180

一、双重或多重免疫染色的基本方法180

二、用于双重或多重免疫染色的标记物及底物182

三、双重免疫荧光染色技术183

四、双重免疫酶染色185

第五节 微波技术在免疫组化中的应用187

第六节 免疫组化实验中常见问题及解决办法192

一、免疫荧光组化染色中常见的非特异性荧光192

二、内源性酶引起的非特异性染色及消除方法194

三、抗体引起的非特异性染色及消除方法195

四、免疫组化染色失败198

五、影响免疫组织化学染色结果的各种因素199

第四章 组织细胞培养技术201

第一节 主要设备和设施201

一、无菌操作设备201

二、实验室其他设备203

第二节 清洗及消毒205

一、各种实验用品的清洗205

二、各种实验用品的消毒207

第三节 培养液及配制209

一、平衡盐溶液209

二、天然培养基210

三、合成培养基213

四、无血清培养基219

第四节 组织培养原则及基本技术220

一、组织培养的原则和要领220

二、基本培养技术221

第五节 常用组织培养法230

一、天然培养基组织培养法230

二、人工培养基组织培养法230

第六节 组织培养中污染的检测和排除240

一、污染的检测241

二、微生物污染的排除243

第七节 组织培养中细胞生物学及遗传学形状观察244

一、组织细胞形态学观察244

一、培养细胞染色体检测法246

第八节 培养细胞遗传学形状检测246

二、电子显微镜观察法246

二、实体瘤细胞染色体制备247

三、瘤细胞系染色体的制备248

四、外周血淋巴细胞染色体制备249

第五章 分子病理学实验基础251

第一节 DNA的基本知识251

一、DNA的理化性质252

二、DNA的复制253

第二节 聚合酶链反应技术254

一、PCR的基本原理254

二、反应体系255

三、循环参数261

四、模板的制备263

六、逆转录－PCR（RT—PCR）265

五、PCR操作程序265

七、PCR扩增产物的检测266

八、PCR操作技术的有关问题及注意点266

九、PCR的质量控制267

十、PCR技术的临床评价270

第三节 DNA凝胶电泳技术271

一、琼脂糖凝胶电泳271

二、聚丙烯酰凝胶电泳（PAGE）274

第四节 原位杂交277

一、基本原理277

二、DNA/cDNA探针的制备277

三、基本方法286

第五节 原位PCR295

四、原位杂交技术的进展295

一、原位PCR的基本原理296

二、常用的原位PCR法296

三、原位PCR的基本步骤298

第六节 辅助性实验室技术307

一、玻璃及塑料器皿的硅化307

二、核酸的纯化307

三、DNA片段的回收310

四、核酸的浓缩312

五、核酸的沉淀312

六、菌种及DNA的保存314

七、DNA含量的测定315

八、透析袋的处理316

九、实验室的安全316

一、电子显微镜的类型318

第六章 电镜技术318

第一节 电子显微镜的基本结构及原理318

二、透射电镜的基本原理319

三、透射电镜的构造321

第二节 电镜的使用及基本设施323

一、电镜的使用323

二、电镜室的基本设施及条件326

第三节 电镜标本的取材、固定和包埋327

一、取材327

二、固定328

三、脱水333

四、浸透与包埋333

一、快速包埋法336

第四节 快速包埋法和原位包埋法336

二、培养细胞原位包埋法338

第五节 超薄切片及染色340

一、铜网和支持膜340

二、修块342

三、半薄切片及其染色343

四、切片刀343

五、切片346

六、超薄切片的染色347

第七章 常用试剂与设备351

第一节 常用实验设备与器材351

一、实验仪器设备351

二、器材352

第二节 常用试剂配制352