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病原生物学实验室生物安全与规则1

第一篇 基础验证篇5

第一部分 医学微生物学5

第一章 细菌形态学5

第一节 病原微生物形态学检查5

实验1-1 悬滴法和压滴法5

实验1-2 单染色法6

实验1-3 革兰染色法7

实验1-4 抗酸染色法7

实验1-5 Fontana镀银染色法8

实验1-6 姬姆萨染色法8

实验1-7 负染色法9

实验1-8 鞭毛染色法（魏曦染色法）9

实验1-9 芽孢染色法10

实验1-10 英膜染色法（黑斯染色）10

实验1-11 Albert染色法与Neisser染色法对异染颗粒的观察10

第二节 光学显微镜的使用及重要的致病菌形态观察11

实验1-12 细菌的基本形态与特殊结构15

实验1-13 重要致病菌的形态16

附录1：染色液的配制17

附录2：擦镜油配制18

第二章 病毒与真菌形态学19

第一节 病毒形态学19

实验2-1 病毒的形态类型19

实验2-2 乙型肝炎病毒颗粒的观察19

实验2-3 轮状病毒的分离及电镜观察20

实验2-4 病毒包涵体的观察20

实验2-5 病毒感染的细胞病变观察20

第二节 真菌形态学21

实验2-6 真菌的基本形态21

实验2-7 浅部真菌病临床标本直接镜检21

实验2-8 深部真菌病临床标本直接镜检22

第三章 微生物培养技术23

第一节 细菌培养技术23

实验3-1 基础培养基制备23

实验3-2 细菌接种技术与培养方法24

实验3-3 主要致病菌的培养及菌落特点28

实验3-4 卫星现象试验31

实验3-5 细菌色素检测法31

第二节 病毒培养技术32

实验3-6 动物接种法32

实验3-7 鸡胚培养法33

实验3-8 细胞培养法36

第三节 真菌培养技术38

实验3-9 真菌培养基制备38

实验3-10 真菌的培养法38

附录3：常用细菌培养基的制备39

第四章 消毒灭菌及生物因素对细菌的影响44

第一节 消毒灭菌44

实验4-1 细菌对湿热的抵抗力46

实验4-2 紫外线对细菌的作用47

实验4-3 常用化学消毒剂的杀菌力47

第二节 噬菌体对细菌的作用47

实验4-4 噬菌体对细菌特异性裂解试验48

第三节 细菌的药物敏感性试验48

实验4-5 纸片扩散法药敏试验48

实验4-6 试管稀释法药敏试验49

实验4-7 E试验法药敏试验49

附录4：纸片扩散法药敏试验纸片含药量和结果解释50

第五章 细菌常见生化反应51

实验5-1 单糖发酵试验51

实验5-2 VP试验51

实验5-3 甲基红试验52

实验5-4 枸橼酸盐利用试验53

实验5-5 吲哚试验53

实验5-6 尿素分解试验53

实验5-7 硫化氢试验54

实验5-8 胆汁溶菌试验54

实验5-9 氧化酶试验54

实验5-10 过氧化氢酶（触酶）试验55

实验5-11 耐热核酸酶试验55

实验5-12 汹涌发酵试验55

实验5-13 肠道致病菌初步生化试验鉴定法56

附录5：用于细菌生化反应的培养基制备及试剂配制56

附录6：常用指示剂的变色范围57

第六章 细菌的变异性58

实验6-1 形态的变异58

实验6-2 鞭毛的变异58

实验6-3 菌落的变异58

实验6-4 耐药性的变异59

实验6-5 半乳糖发酵基因的转导59

附录7：含镁离子的缓冲液配制60

第七章 细菌的致病性与免疫性61

第一节 细菌的致病性61

实验7-1 荚膜的致病作用61

实验7-2 血浆凝固酶试验62

实验7-3 透明质酸酶试验62

实验7-4 鲎试验63

实验7-5 内毒素的致病作用63

实验7-6 Elek平板毒力试验63

实验7-7 产气荚膜梭菌致病性试验64

实验7-8 Nagler反应64

实验7-9 结核分枝杆菌毒力试验65

实验7-10 结核分枝杆菌的索状生长现象65

第二节 宿主的免疫性66

实验7-11 溶菌酶测定66

实验7-12 吞噬试验66

附录8：溶菌酶测定等试验相关试剂及培养基配制67

第八章 免疫学检测69

实验8-1 玻片凝集试验69

实验8-2 肥达试验69

实验8-3 抗链球菌溶血素“O”试验70

实验8-4 外斐反应70

实验8-5 钩端螺旋体显微凝集试验71

实验8-6 不加热血清反应素试验71

实验8-7 快速血浆反应素试验72

实验8-8 荧光密螺旋体抗体吸收试验72

实验8-9 血凝抑制试验73

实验8-10 病毒中和试验75

实验8-11 酶联免疫吸附试验76

第九章 病原分子生物学技术79

实验9-1 质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳79

实验9-2 DNA的限制性核酸内切酶酶切和连接试验80

实验9-3 耐药质粒DNA转化试验81

实验9-4 PCR方法检测耐甲氧西林葡萄球菌82

第十章 微生物学检测技术的自动化84

实验10-1 病原微生物的自动化检测85

第二部分 寄生虫学87

第十一章 寄生虫形态学87

第一节 线虫87

实验11-1 似蚓蛔线虫88

实验11-2 十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫89

实验11-3 蠕形住肠线虫90

实验11-4 毛首鞭形线虫91

实验11-5 班氏吴策线虫和马来布鲁线虫91

实验11-6 旋毛形线虫93

实验11-7 粪类圆线虫93

第二节 吸虫93

实验11-8 华支睾吸虫94

实验11-9 布氏姜片吸虫95

实验11-10 卫氏并殖吸虫96

实验11-11 日本裂体吸虫及其他裂体吸虫97

第三节 绦虫99

实验11-12 链状带绦虫和肥胖带绦虫99

实验11-13 细粒棘球绦虫101

实验11-14 多房棘球绦虫102

实验11-15 微小膜壳绦虫102

实验11-16 曼氏迭宫绦虫103

第四节 原虫103

实验11-17 溶组织内阿米巴和结肠内阿米巴104

实验11-18 蓝氏贾第鞭毛虫105

实验11-19 阴道毛滴虫106

实验11-20 杜氏利什曼原虫106

实验11-21 疟原虫107

实验11-22 刚地弓形虫108

实验11-23 微小隐孢子虫109

第五节 节肢动物110

实验11-24 昆虫纲形态110

实验11-25 蛛形纲形态111

附录9：人体常见寄生虫虫卵的鉴别113

第十二章 寄生虫感染的诊断技术114

第一节 病原学诊断方法114

实验12-1 粪便检查114

实验12-2 血液检查117

实验12-3 肛周检查119

实验12-4 其他组织器官检查119

实验12-5 阴道分泌物检查121

第二节 免疫学诊断方法121

实验12-6 皮内试验121

实验12-7 环卵沉淀试验122

实验12-8 尾蚴膜反应122

第十三章 寄生虫培养技术及动物模型124

第一节 寄生虫的体外培养124

实验13-1 弓形虫滋养体（速殖子）培养124

实验13-2 阴道毛滴虫培养125

实验13-3 溶组织内阿米巴培养126

实验13-4 利什曼原虫培养128

第二节 寄生虫的动物模型128

实验13-5 旋毛虫动物模型128

实验13-6 日本血吸虫动物模型129

实验13-7 华支睾吸虫动物模型129

实验13-8 鼠疟原虫动物模型129

实验13-9 刚地弓形虫动物模型129

实验13-10 杜氏利什曼原虫动物模型130

第二篇 综合设计篇133

第十四章 细菌鉴定的基本程序133

第十五章 呼吸道感染病原体135

实验15-1 呼吸道标本的病原体检查135

第十六章 胃肠道感染病原体139

实验16-1 胃肠道标本的病原体检查139

第十七章 血液及骨髓感染病原体142

实验17-1 血液或骨髓标本的病原体检查142

第十八章 创伤感染病原体147

实验18-1 脓汁、创伤分泌物的病原体检查147

第十九章 泌尿生殖系统感染病原体150

实验19-1 泌尿生殖道标本的病原体检查150

第三篇 自主探究篇155

第二十章 自主探究155

实验20-1 自主探究实验155

第二十一章 免疫学技术在感染性疾病诊断中的应用158

第二十二章 分子生物学技术在感染性疾病诊断中的应用161

参考文献164