图书介绍

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汉英医学分子生物学实验方法
  • 郑维主编 著
  • 出版社： 北京：中国协和医科大学出版社
  • ISBN：7810726188
  • 出版时间：2005
  • 标注页数：606页
  • 文件大小：31MB
  • 文件页数：623页
  • 主题词：医药学：分子生物学－实验方法－汉、英

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图书目录

1．质粒1

1.1 用碱裂解并SDS法制备小量质粒DNA1

1.2 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA7

1.3 用QIAGEN质粒大提试剂盒制备大量质粒DNA11

1.4 用氯化钙制备和转化大肠杆菌感受态细胞17

1.5 定向克隆到质粒载体23

1.6 PCR产物克隆至T载体31

2．聚合酶链式反应37

2.1 聚合酶链式反应体外扩增DNA37

2.2 反转录聚合酶链式反应49

2.3 实时定量PCR55

3．常用的凝胶电泳67

3.1 核酸凝胶电泳67

3.1.1 琼脂糖凝胶电泳67

3.1.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳73

3.2 蛋白质凝胶电泳83

3.2.1 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳83

3.2.2 双相电泳93

4．放射性探针的制备109

4.1 均一标记DNA探针的合成109

4.2 RNA探针的合成115

4.3 cDNA探针的合成121

4.4 合成寡核苷酸的标记125

5．DNA131

5.1 用QIAquick凝胶提取试剂盒从琼脂糖凝胶中回收和纯化DNA片段131

5.2 哺乳动物细胞DNA的分离135

5.2.1 应用蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子量的DNA135

5.2.2 鼠尾和其他小样本基因组DNA的制备141

5.3 Southern杂交分析基因组DNA145

5.4 DNA的斑点与狭缝杂交161

5.5 微点阵技术167

5.6 DNA测序191

5.7 单链构象多态性分析（SSCP）201

5.8 变性的高效液相色谱207

5.9 DNA基因分型215

5.9.1 微卫星基因分型215

5.9.2 PCR-RFLP SNP基因分型223

5.9.3 焦磷酸测序SNP基因分型229

6．RNA245

6.1 用TRIzol？试剂分离总RNA245

6.2 用Oligotex mRNA小提试剂盒从总RNA纯化poly A+mRNA251

6.3 Northern杂交255

6.4 cDNA末端快速扩增（RACE）263

7.1 TNT快速转录翻译系统275

7．克隆基因在体外及原核细胞中的表达275

7.2 GST融合蛋白的纯化281

7.3 GST吸附实验289

8．克隆基因在哺乳动物细胞中的表达295

8.1 哺乳动物细胞的体外培养295

8.2 细胞周期分析307

8.3 DNA转染311

8.3.1 磷酸钙和DNA共沉淀的转染311

8.3.2 阳离子脂质体转染DNA317

8.3.3 DNA的电穿孔转染321

8.4 应用GeneEditorTM的DNA体外定点诱变系统327

9．病毒341

9.1 快速产生重组腺病毒的简便系统341

9.2 反转录病毒的产生351

10．蛋白质检测与分析367

10.1 免疫沉淀法367

10.2 Western杂交373

10.3 酶联免疫吸附实验（ELISA）381

11．真核基因表达调控389

11.1 凝胶改变法389

11.2 荧光素酶法397

11.3 DNA甲基化分析405

11.4 核组蛋白免疫沉淀法（ChIP）411

11.5 RNA干扰（RNAi）421

12．组织学429

12.1 组织切片的制备和H E染色429

12.2 免疫组织化学435

13．蛋白质组学技术447

13.1 二维蛋白凝胶电泳——真核细胞样品的制备447

13.1.1 从酵母制备2D蛋白提取物447

13.1.2 从哺乳动物细胞制备分部去垢剂提取物453

13.2 色谱（层析法）465

13.3 为质谱蛋白鉴定作凝胶内酶切479

13.4 质谱487

14.1.1 检测DNA断裂——凋亡DNA阶梯495

14．细胞凋亡的检测方法495

14.1 细胞群体凋亡的研究方法495

14.1.2 凋亡诱导的蛋白酶－Caspase3活性检测503

14.2 单个细胞凋亡的研究方法507

14.2.1 APO-BRDUTM试剂盒507

14.2.2 检测细胞膜变化513

15．转基因和基因敲除小鼠的构建517

15.1 应用显微注射法制备转基因小鼠517

15.2 基因打靶小鼠的制备553

附录1．常用的试剂和溶液589

附录2．常用的生物学网站601

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