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第一篇　植物生理生化实验原理3

第一章　植物生理生化实验技术的一般原理3

1.1　植物材料的种类3

1.2　植物材料的采取3

实验58　谷类作物种子中赖氨酸含量的3

1.3　分析样品的前处理和保存4

1.4　待测组分的提取、分离和纯化技术5

1.5 样品中待测组分的测定8

1.6 实验结果的数据处理与分析8

第二章　离心技术11

2.1　基本原理11

2.2 离心机的类型及主要构造13

2.3　常用离心技术14

2.4　分析性超速离心技术的应用16

3.1 层析原理18

第三章　层析技术18

3.2 分配层析20

3.3　吸附层析21

3.4　凝胶层析23

3.5 离子交换层析24

3.6 亲和层析25

3.7 气相色谱26

3.8 高压液相色谱28

3.9　毛细管电泳色谱29

3.10　层析技术的应用实例29

第四章　电泳技术32

4.1 电泳基本原理32

4.2 影响迁移率的主要因素33

4.3　凝胶电泳34

4.4 电泳的应用46

第五章　红外线CO2气体分析技术48

5.1 红外线CO2气体分析仪的工作原理48

5.2 红外线CO2气体分析仪的类型51

5.3 红外线CO2气体分析技术的应用56

第六章　光学分析技术59

6.1 紫外光-可见光分光光度法59

6.2　原子吸收分光光度法70

6.3　火焰分光光度法74

6.4　荧光分光光度法76

6.5　旋光分析法80

第七章　气体测压技术83

7.1 气体测压技术的类型及基本原理83

7.2 气体测压技术的应用85

8.1 电化学分析技术的类型及基本原理89

第八章　电化学分析技术89

8.2 电化学分析技术的应用91

8.3　DDS-12A型数字式电导率仪的基本原理及使用方法91

第九章　免疫化学技术——酶联免疫吸附测定（ELISA）93

9.1 ELISA的原理93

9.2　设计和合成特定的免疫原94

9.3　抗体的制备94

9.4　标记抗原的制备95

9.5　ELISA测定程序的设计95

9.6 总结96

第十章 Southern blotting和PCR反应原理与技术97

10.1 Southern杂交97

10.2 PCR反应100

第二篇　植物生理生化实验技术105

实验1　植物组织中自由水和束缚水含量的测定105

Ⅰ 小液流法109

实验2　植物组织水势的测定109

Ⅱ 折光仪法110

Ⅲ 压力室法110

实验3　植物细胞渗透势的测定（质壁分离法）113

实验4　钾离子对气孔开度的影响115

实验5　植物伤流液中糖和氨基酸的鉴定116

实验6　根系活力的测定（TTC法）118

实验7　植物组织中金属元素的测定（原子吸收分光光度法）120

实验8　植物体内硝态氮含量的测定122

实验9　植物体内硝酸还原酶活力的测定124

Ⅰ 离体法124

Ⅱ 活体法126

实验10　用真空渗入法测定环境因子对光合作用的影响128

实验11　叶绿体色素的提取、分离和理化性质130

Ⅰ 提取与分离130

Ⅱ 理化性质131

实验12　叶绿素含量的测定134

实验13　希尔反应的观察137

实验14　核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶活性的测定138

Ⅰ 分光光度法138

Ⅱ 同位素法140

实验15 乙醇酸氧化酶活性的测定142

实验16 红外线CO2气体分析仪法测定植物光合速率与呼吸速率144

Ⅰ 密闭系统斜率法144

Ⅱ 密闭系统落差法148

实验17 TPS-1便携式光合作用系统测定光合速率、呼吸速率和蒸腾速率150

实验18　氧电极法测定光合速率和呼吸速率153

实验19 叶绿体光诱导荧光强度的测定157

实验20 叶绿体中甘油醛-3-磷酸脱氢酶活性的测定159

实验21　微量定容测压法测定种子的呼吸速率162

实验22　小篮子法（广口瓶法）测定植物的呼吸速率165

实验23　愈创木酚法测定过氧化物酶活性167

实验24　过氧化氢酶活性测定169

Ⅰ 紫外吸收法169

Ⅱ 高锰酸钾滴定法170

实验25 氮蓝四唑（NBT）法测定超氧物歧化酶活力172

实验26　淀粉酶活性的测定174

实验27　脲酶Km值的测定177

实验28　植物过氧化物酶同工酶测定（圆盘式凝胶电泳法）180

实验29　蛋白质相对分子质量的测定（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）183

实验30　植物组织中蛋白质含量的271

测定271

Ⅰ 茚三酮显色法271

Ⅱ 染料结合法（DBL）273

实验59　脯氨酸含量的测定278

实验60　植物组织中丙二醛含量的测定280

实验61　植物抗逆性的鉴定（电导仪法）282

实验62　综合实验1-大豆为材料284

实验63　综合实验2-甜叶菊叶片为材料285

附录286

附录1　硫酸铵饱和度常用表286

附录2　实验中常用酸碱的相对密度和浓度的关系288

附录3　常用固态酸、碱、盐的摩尔浓度配制参考表288

附录4　常用酸碱指示剂289

附录5　常用缓冲溶液的配制289

附录6　植物组织培养常用培养基293

附录7　常用计量单位294

附录8　常见的植物生长调节物质及其主要性质296

附录9　植物激素与生长调节剂在农业生产中的应用297

主要参考文献299